Разработка условий оптимизации процесса амплификации ДНК
- Введение
- RealTime ПЦР
- Виды RealTime ПЦР
- Использование зондов с комплементарными концевыми последовательностями (molecular beacons).
- Применение 2-х зондов с резонансным переносом энергии (Fluorescent resonance energy transfer - FRET).
- Использование интеркалирующих агентов.
- Кинетические параметры
- Биологические микрочипы
- ДНК-микрочипы
- Гибридизация-основа технологии
- Применение ДНК-чипов
- Материалы и методы
- Изготовление микропланшетов
- Определение спектра поглощения и эмисии SYBRgreen
- Протоколы полимеразной цепной реакции. Постановка реакции с использованием фирменного набора(система SYBgreen)
- Постановка реакции без использования фирменного набора(система SYBRgreen)
- Протокол полимеразной цепной реакции с использованием TaqMan.
- Электрофоретическое разделение нуклеиновых кислот в 8% ПААГ
- Система детекции результатов анализа
- Результаты и обсуждение. Определение зависимости сигнала флуоресценции от концентрации ДНК
- Проведение ПЦР в разных объемах смеси в пробирках
- Проведение ПЦР реакции в пластиковых микропланшетах
- Постановка ПЦР в микрообъеме с отрицательными контролями
- Электрофоретическое разделение нуклеиновых кислот в образцах ПЦР-смеси после амплификации
- Выводы.
- Заключение.
Принципы клонирования
Чтобы понять, как использовались концепции трансдукции при разработке методов получения рекомбинантных ДНК, нам следует ознакомиться с тем, что представляет собой клонирование. Клон вируса или клеток–это некая популяция, каждый член которой ведет происхождение от одного репродуцирующегося вириона или от одной клетки соответственно. Все ...
Приборы для взятия проб
Почвенный образец берут буром, лопатой и ножом. В поле перед взятием образца их тщательно очищают, затем обрабатывают спиртом и обжигают. Можно ограничиться очисткой этих предметов, если затем несколько раз воткнуть их в почву изучаемого горизонта. Укладывают образец в заранее приготовленную стеклянную широкогорлую стерильную банку, зак ...
Толерантность
Жизнь, весьма вероятно, возникла в море. По сравнению с другими биомами биомы морской среды сравнительно устойчивы. Флуктуации таких физических факторов, как температура и содержание кислорода, здесь невелики, поэтому внутренняя среда многих морских беспозвоночных мало подвержена нарушениям. Такие животные обычно являются конформерами в ...