Разработка условий оптимизации процесса амплификации ДНК
- Введение
- RealTime ПЦР
- Виды RealTime ПЦР
- Использование зондов с комплементарными концевыми последовательностями (molecular beacons).
- Применение 2-х зондов с резонансным переносом энергии (Fluorescent resonance energy transfer - FRET).
- Использование интеркалирующих агентов.
- Кинетические параметры
- Биологические микрочипы
- ДНК-микрочипы
- Гибридизация-основа технологии
- Применение ДНК-чипов
- Материалы и методы
- Изготовление микропланшетов
- Определение спектра поглощения и эмисии SYBRgreen
- Протоколы полимеразной цепной реакции. Постановка реакции с использованием фирменного набора(система SYBgreen)
- Постановка реакции без использования фирменного набора(система SYBRgreen)
- Протокол полимеразной цепной реакции с использованием TaqMan.
- Электрофоретическое разделение нуклеиновых кислот в 8% ПААГ
- Система детекции результатов анализа
- Результаты и обсуждение. Определение зависимости сигнала флуоресценции от концентрации ДНК
- Проведение ПЦР в разных объемах смеси в пробирках
- Проведение ПЦР реакции в пластиковых микропланшетах
- Постановка ПЦР в микрообъеме с отрицательными контролями
- Электрофоретическое разделение нуклеиновых кислот в образцах ПЦР-смеси после амплификации
- Выводы.
- Заключение.
Снижение апоптоза
Продукт р53 гена следит за целостностью генома при митозе. При нарушении целостности генома клетка переключается на апоптоз. Наоборот, белок bcl-2 ингибирует апоптоз. Таким образом, недостаток р53 или избыток bcl-2 приводит к накоплению клеток: эти нарушения наблюдаются в различных опухолях. Изучение факторов регулирующих апоптоз имеет ...
Антигенсвязывающие центры антител
Согласно рентгеноструктурным исследованиям комплексов Fab-фрагментов с антигенами связывание антигена происходит в доступной растворителю щели активного центра, образованной вариабельными доменами в N-концевой части легкой и тяжелой цепей. Длина щели антител варьирует от 0,4 до 3,4 нм, а средние размеры области связывания для полимерных ...
Электрофоретическое разделение нуклеиновых кислот в 8% ПААГ
Для приготовления геля было использовано.
gels
1
2
H2O (мл)
3,7
7,4
30%АА/bAA (29:1) (мл)
1,87
3,74
5х ТВЕ (мл)
1,4
2,8
TEMED (мкл)
20
40
10% PSA (мкл)
27
54
Собирали кассету с вертикальными пластинками. В гель вносили полимеризаторы, перемешивали и заливали 4.2 мл меж ...
