Изготовление микропланшетов
Для эксперимента были изготовлены пластины размером 50х50 мм с рабочей зоной 20х20 мм с различным количеством лунок (до 91 шт). При изготовлении планшетов мы руководствовались размером термокамер в экспериментальном образце амплификотора, поэтому такие их длина и ширина являются оптимальными. Схема амплификатора представлена на рис. 10.
Материал, из которого должны быть изготовлены плашки должен обладать следующими свойствами:
ü термостойкость (материал должен выдерживать минимум 95 С-самая высокая температура в цикле);
ü прочность (не должен подвергаться деформации даже при незначительных механических воздействиях);
ü химическая инертность (материал не должен взаимодействовать с компонентами ПЦР смеси);
ü дешевизна(материал должен быть не дорогим и доступным).
Экспериментально был подобран материал, который обладает всеми вышеперечисленными качествами – это полимерная пленка Aikor DecoDesign Black (производство Германия). Изготовление плашек делали путем термоформовки на металлической матрице с помощью металлического пуансона-позиционера как показано на рис 11. В результате получали планшеты с лунками объем которых бал равен 1,5 мм3.
Постановка ПЦР в микрообъеме с отрицательными контролями
ПЦР ставили по протоколам с использованием SYBRgreen и TaqMan. Общий объем ПЦР смеси составлял 1 мкл. Количество внесенной матрицы одинаково – 7 нг. Контролем служили пробы без матрицы. Измерение и регистрацию флуоресцентного сигнала проводили с помощью описанной системы детекции и программы «Qwantа». Результаты измерений представлены в ...
Диморфизм и плеоморфизм
Для дрожжей, как и для других грибов, известны явления диморфизма и плеоморфизма. Мицелиально-дрожжевой диморфизм проявляется в том, что один вид может расти в двух формах – одноклеточной и мицелиальной. Это явление известно в микологии и связано с двумя типами роста – сферическим и апикальным. Есть дрожжи, которые образуют только однок ...
Современные представления о происхождении жизни на Земле
В настоящее время ученые выделяют пять научных концепций возникновения жизни:
1. Возникновение живого из неживого, подчиняясь определенным физическим и химическим закономерностям - абиотическая концепция;
2. Гипотеза «голобиоза» - концепция протобионта либо биода, некоего доклеточного предка, начальных «жизнеспособных» структур;
3. Г ...
