Материалы » Разработка условий оптимизации процесса амплификации ДНК » Протокол полимеразной цепной реакции с использованием TaqMan.

Протокол полимеразной цепной реакции с использованием TaqMan.

На одну пробу объемом 20 мкл смешивают:

· 8,75 мкл смеси А,

· 8,75 мкл смеси Б,

· 0,2 мкл Taq-полимеразы,

· 2 мкл ДНК.

95о С 5 мин

1 цикл

95о С 20 сек

40 циклов

62о С 20 сек

72 о С 40 сек

и по окончании нужного количества циклов

72 о С 40 сек


Диагностическое значение определения некоторых ферментов в крови
Определение активности ферментов все шире используется в диагностических целях в медицинской и ветеринарной практике. Этому способствует выяснение высокой информативности данного показателя для выявления патологического процесса на ранних стадиях заболевания, а также выпуск отечественных и зарубежных наборов необходимых реактивов, что з ...

Изучение активности ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла
а) Распределение активности ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в тканях интактных самок крыс В ходе проведения эксперимента достоверное изменение активности ФМСФ-КП обнаружено только в яичниках. В этом органе активность фермента на стадии проэструса и эструса была в 1,7 и 1,9 раза соответственно выше по сравнению с диэструсом (табл.5) ...

Определение активности карбоксипептидазы Н
50мкл 1% гомогената смешивали со 150мкл 50мМ натрий-ацетатного буфера, рН 5.6, в случае контрольной пробы; в случае опытной пробы 50мкл 1% гомогената смешивали со 140мкл 50мМ натрий-ацетатного буфера, рН 5.6 с добавлением 10мкл ГЭМЯК. Смесь инкубировали 8 мин при 37°C. Реакцию начинали прибавлением 50мкл субстрата (DNS-фен-лей-арг, при ...