Материалы » Разработка условий оптимизации процесса амплификации ДНК » Протокол полимеразной цепной реакции с использованием TaqMan.

Протокол полимеразной цепной реакции с использованием TaqMan.

На одну пробу объемом 20 мкл смешивают:

· 8,75 мкл смеси А,

· 8,75 мкл смеси Б,

· 0,2 мкл Taq-полимеразы,

· 2 мкл ДНК.

95о С 5 мин

1 цикл

95о С 20 сек

40 циклов

62о С 20 сек

72 о С 40 сек

и по окончании нужного количества циклов

72 о С 40 сек


Методы исследования. Метод определения активности карбоксипептидазы Н и карбоксипептидазы М
Активность КПН определяли модифицированным методом Fricker и Snyder [153]. Для определения активности КПН 50 мкл гомогената ткани добавляли к 150 мкл (в случае опытной пробы) 50 мМ натрий-ацетатного буфера, рН 5,6, содержащего 50 мМ NaCl или к смеси 140 мкл вышеуказанного буфера и 10 мкл 25 мкМ водного раствора ингибитора ГЭМЯК (в случ ...

Понятие «химический элемент» и «химическое соединение» с точки зрения современности
Химический элемент – это «кирпичик» вещества. Периодический закон Д.И. Менделеева сформулировал зависимость свойств химических элементов от атомной массы, признаком элемента стало его место в периодической системе, определяемое атомной массой. Физика помогла составить представление об атоме, как о сложной квантово-механической системе, ...

Убежища маньчжурского зайца.
Характер распределения и численность маньчжурских зайцев зависит не только от качества кормовой базы, но и от наличия подходящих для них убежищ. В отличие от других видов зайцев, маньчжурские зайцы в случае опасности неохотно покидают места лёжек. Лёжки у маньчжурских зайцев бывают трёх типов: открытые, закрытые и убежища (Дулькейт, 195 ...