Материалы » Разработка условий оптимизации процесса амплификации ДНК » Проведение ПЦР в разных объемах смеси в пробирках

Проведение ПЦР в разных объемах смеси в пробирках
Страница 2

Таблица 3.

Объем смеси

(мкл)

Образцы с матрицей

(у.е. флуоресценци)

Образцы без матрицы

(у.е. флуоресценции)

Приращение сигнала

(у.е. флуоресценции)

Образцы с матрицей

(у.е. флуоресценции)  

Образцы без матрицы

(у.ефлуоресценции)  

Приращение сигнала

(

у.е. флуоресценции)

в микропробирках

в объеме 1мкл в пластиковых микрострипах

1

218,43

199,52

18,91

98,48

78,61

19,87

2

226,78

202,54

24,24

90,61

81,81

8,80

3

187,78

156,85

30,93

92,38

76,21

16,17

4

199,48

166,48

33,01

112,30

97,60

14,70

5

215,14

186,65

28,49

–

65,43

–

По результатам видно, что амплификация прошла во всех пробах, так как во всех случаях число, означающее приращение флуоресцентного сигнала, является положительным. Если обратить внимание на приращение сигнала в образцах измеряемых в микрострипах и сравнить с друг с другом, можно сделать вывод, что амплификация в одном мкл прошла не менее эффективно, чем в остальных объемах. Следующий этап работы – это проведение реакции в пластиковых микропланшетах в объеме смеси 1 мкл.

Страницы: 1 2 


Пищеварение в желудке
Многочисленные железы слизистой оболочки желудка вырабатывают желудочный сок. Основным ферментом его является пепсин, расщепляющий сложные молекулы белка на более простые молекулы аминокислот. Пищеварение в желудке происходит только при температуре тела 35—37 °С и при наличии в желудочном соке соляной кислоты, повышающей активность ферм ...

Органы чувств
Приспособлены к функционированию в водной среде. Орган зрения не эволюционировал на дальнее видение. Рыбы способны видеть только близко расположенные предметы. Обоняние острое, позволяющее держаться в стае и обнаруживать пищу. Мигрирующие рыбы находят родные реки по запаху воды. Орган слуха и равновесия представлен только внутренним ...

Применение 2-х зондов с резонансным переносом энергии (Fluorescent resonance energy transfer - FRET).
Данный способ детекции накопления продуктов амплификации отличается повышенной специфичностью, так как увеличение флуоресценции происходит при комплементарном связывании с ампликонами сразу 2-х ДНК зондов [11] (Рис 3). Принцип метода заключается в переносе энергии от одного флуорофора, находящегося на 3` конце первого зонда, ко второму ...